Poderão participar da Copa Rio de 2010 até 20 associações a saber:
1- Até 08 associações dentre as melhores classificadas no Campeonato Estadual da Série A de profissionais de 2009, que não estejam classificadas para qualquer das séries A, B ou C do Campeonato Brasileiro de 2010, que estejam em situação regular junto à FERJ, que não tenham impedimentos por penalidade imposta pelo TJD e comprovem ter estádio à disposição para a competição;
2- Até 06 associações dentre as melhores classificadas no Campeonato Estadual da Série B de profissionais de 2009, que estejam em situação regular junto à FERJ, que não tenham impedimentos por penalidade imposta pelo TJD, comprovem ter estádio à disposição para a competição e tenham confirmado sua participação no prazo estabelecido pela FERJ.
3- Até 04 associações dentre as melhores classificadas no Campeonato Estadual da Série C de profissionais de 2009, que estejam em situação regular junto à FERJ, que não tenham impedimentos por penalidade imposta pelo TJD, comprovem ter estádio à disposição para a competição e tenham confirmado sua participação no prazo estabelecido pela FERJ.

A Copa Rio será disputada em fases classificatórias, sendo que na primeira fase participarão as equipes das Série B e C, exceto as campeãs de 2009, jogando entre si, dentro do grupo (grupo A), em turno e returno, classificando-se para a segunda fase as 04 associações melhores classificadas.

Na segunda fase participarão as associações classificadas na primeira fase, as associações da Série A de 2009, a campeã da Série C de 2009 e a campeã da Copa Rio de 2009, divididas em 03 grupos (B, C e D), classificando-se para a terceira fase 08 associações: as duas primeiras colocadas de cada grupo e as duas de melhor índice técnico dentre as colocadas em terceiro lugar.

Na terceira fase as associações serão divididas em dois grupos de quatro associações (grupos E e F), classificando-se para a final as vencedoras de cada grupo.

Na final (grupo G), as associações jogarão duas partidas, em sistema de ida e volta, tendo a associação de melhor índice técnico, classificada na fase anterior, o direito de escolha do mando de campo.
Será declarada campeã a melhor classificada ao final da segunda partida da última fase.
Nas finais do Campeonato, após o encerramento do segundo jogo, em que venha apontar empate em números de pontos ganhos nessa fase, será declarada Campeã a associação com o melhor saldo de gols, computados nos dois jogos da fase decisiva. Ainda persistindo o empate, a decisão dar-se-á pela cobrança de tiros livres diretos da marca do penalty, na forma prevista pela FIFA para as competições internacionais.
A associação campeã terá o direito de optar por ser indicada à CBF para a Copa do Brasil do ano subsequente ou para Série D do Campeonato Brasileiro do ano subseqüente, e a associação vice-campeã será indicada à CBF para uma das duas competições aqui mencionadas que não tenha sido escolhida pela campeã.